الفوسفاتيز القلوي (ALP)

يُشتق الفوسفاتاز القلوي من سلالة الإشريكية القولونية المؤتلفة التي تحمل جين TAB5.يحفز الإنزيم نزع الفسفرة لنهايات 5´ و 3´ من فسفومونويستر الحمض النووي الريبي والحمض النووي الريبي.كما أنه يحلل الريبوز ، وكذلك ثلاثي فوسفات ديوكسي ريبونوكليوزيد (NTPs و dNTPs).يعمل TAB5 الفوسفاتيز القلوي على 5 درجات بارزة و 5 درجات غائرة ونهايات غير حادة.يمكن استخدام الفوسفاتيز في العديد من تطبيقات البيولوجيا الجزيئية ، مثل الاستنساخ أو وضع العلامات على نهاية المسبار لإزالة نهايات الفسفرة من الحمض النووي أو الحمض النووي الريبي.في تجارب الاستنساخ ، تمنع إزالة الفسفرة DNA البلازميد الخطي من الارتباط الذاتي.يمكن أن يؤدي أيضًا إلى تدهور dNTPs غير المدمجة في تفاعلات PCR لإعداد قالب لتسلسل الحمض النووي.يتم تعطيل الإنزيم تمامًا وبصورة نهائية عن طريق التسخين عند 70 درجة مئوية لمدة 5 دقائق ، مما يجعل إزالة الفوسفاتاز قبل الربط أو وضع العلامات النهائية أمرًا غير ضروري.