2 × PCR ماستر ميكس (بدون صبغ)
PCR Master Mix هو نوع من محلول PCR التقليدي المخلوط مسبقًا والجاهز للاستخدام، بما في ذلك Taq DNA Polymerase وdNTP mix MgCl2 والمخزن المؤقت الأمثل.أثناء التفاعل، يمكن إضافة التمهيدي والقالب فقط للتضخيم، مما يبسط إلى حد كبير خطوات تشغيل التجربة.يحتوي هذا المنتج على مثبتات ممتازة ويمكن تخزينه لمدة 3 أشهر عند درجة حرارة 4 درجات مئوية.يحتوي منتج PCR على نتوء 3′-dA ويمكن استنساخه بسهولة في ناقل T.
شروط التخزين
يجب تخزين المنتج في درجة حرارة -25 درجة مئوية إلى -15 درجة مئوية لمدة عامين.
تحديد
| الإخلاص (مقابل طاق) | 1× |
| بداية ساخنة | No |
| البروز | 3′-أ |
| بوليميريز | طق DNA بوليميريز |
| تنسيق رد الفعل | سوبر ميكس أو ماستر ميكس |
| سرعة رد الفعل | معيار |
| نوع المنتج | PCR ماستر ميكس (2×) |
تعليمات
1.نظام رد الفعل
| عناصر | الحجم (ميكروليتر) |
| قالب الحمض النووي | مناسب |
| التمهيدي 1 (10 ميكرومول/لتر) | 2 |
| التمهيدي 2 (10 ميكرومول / لتر) | 2 |
| PCR ماستر ميكس | 25 |
| ddH2O | إلى 50 |
2.بروتوكول التضخيم
| خطوات الدورة | درجة الحرارة (درجة مئوية) | وقت | دورات |
| ما قبل تمسخ الطبيعة | 94 درجة مئوية | 5 دقائق | 1 |
| تمسخ | 94 درجة مئوية | 30 ثانية | 35 |
| التلدين | 50-60 درجة مئوية | 30 ثانية | |
| امتداد | 72 درجة مئوية | 30-60 ثانية/كيلو بايت | |
| التمديد النهائي | 72 درجة مئوية | 10 دقائق | 1 |
ملحوظات:
1) استخدام القالب: 50-200 نانوغرام من الحمض النووي الجيني؛0.1- 10 نانوغرام من الحمض النووي البلازميد.
2) ملغ2+التركيز: يحتوي هذا المنتج على 3 ملم من MgCl2 المناسب لمعظم تفاعلات PCR.
3) درجة حرارة التلدين: يرجى الرجوع إلى قيمة Tm النظرية للبادئات.يمكن ضبط درجة حرارة التلدين على 2-5 درجة مئوية أقل من القيمة النظرية للمادة التمهيدية.
4) تمديد الوقت: لتحديد الجزيئي، يوصى بـ 30 ثانية/كيلو بايت.لاستنساخ الجينات، 60يوصى بالثانية/كيلو بايت.
ملحوظات
1.من أجل سلامتك وصحتك، يرجى ارتداء معاطف المختبر والقفازات التي تستخدم لمرة واحدة أثناء التشغيل.
2.للاستخدام البحثي فقط!
