خطوة واحدة سريعة مسبار RT-qPCR Premix-UNG
رقم القط: HCR5143A
One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST) عبارة عن مجموعة أدوات كشف سريع RT-qPCR قائمة على المسبار ومناسبة لـ PCR أحادي أو متعدد الإرسال باستخدام RNA كقالب (مثل فيروس RNA).يستخدم هذا المنتج جيلًا جديدًا من بوليميريز الحمض النووي Taq المعدل بالأجسام المضادة والنسخ العكسي المخصص بخطوة واحدة، مع مخزن مؤقت محسّن للتضخيم السريع، والذي يتميز بسرعة تضخيم أسرع وكفاءة تضخيم أعلى وخصوصية.وهو يدعم التضخيم المتوازن في كل من الإرسال الفردي والمتعدد للعينات ذات التركيز المنخفض والعالي في وقت قصير.
عناصر
1. 5×RT-qPCR عازلة (U+)
2. مزيج الإنزيم (U+)
ملحوظات:
أ.يتضمن المخزن المؤقت 5×RT-qPCR (U+) dNTP وMg2+;
ب.يشتمل مزيج الإنزيم (U+) على إنزيم النسخ العكسي، وبوليميراز الحمض النووي Hot Start Taq، ومثبط RNase وUDG؛
ج.استخدم نصائح خالية من RNase، وأنابيب EP، وما إلى ذلك.
قبل الاستخدام، قم بخلط المخزن المؤقت 5×RT-qPCR جيدًا (U+).إذا كان هناك أي هطول بعد الذوبان، انتظر حتى يعود المخزن المؤقت إلى درجة حرارة الغرفة، واخلطه وحله، ثم استخدمه بشكل طبيعي.
شروط التخزين
يتم شحن المنتج مع الثلج الجاف ويمكن تخزينه في درجة حرارة -25~-15 درجة مئوية لمدة سنة واحدة.
تعليمات
1. رد الفعل نظام
| عناصر | الحجم (20 ميكرولتر رد فعل) |
| 2 × RT-qPCR العازلة | 4 ميكرولتر |
| مزيج الانزيم (U+) | 0.8 ميكرولتر |
| التمهيدي إلى الأمام | 0.1 ~ 1.0 ميكرومتر |
| عكس التمهيدي | 0.1 ~ 1.0 ميكرومتر |
| مسبار تاكمان | 0.05 ~ 0.25 ميكرومتر |
| نموذج | × ميكرولتر |
| مياه خالية من RNase | ما يصل إلى 25μL |
ملاحظات: حجم التفاعل هو 10-50μL.
2. بروتوكول ركوب الدراجات (Sتاندارد)
| دورة خطوة | درجة حرارة. | وقت | دورات |
| النسخ العكسي | 55 درجة مئوية | 10 دقائق | 1 |
| تمسخ الأولي | 95 درجة مئوية | 30 ثانية | 1 |
| تمسخ | 95 درجة مئوية | 10 ثانية | 45 |
| الصلب / التمديد | 60 درجة مئوية | 30 ثانية |
| بروتوكول ركوب الدراجات (سريع) دورة خطوة |
درجة حرارة. |
وقت |
دورات |
| النسخ العكسي | 55 درجة مئوية | 5 دقائق | 1 |
| تمسخ الأولي | 95 درجة مئوية | 5 ثانية | 1 |
| تمسخ | 95 درجة مئوية | 3 ثانية | 43 |
| الصلب / التمديد | 60 درجة مئوية | 10 ثانية |
ملحوظات:
أ.تتراوح درجة حرارة النسخ العكسي بين 50 درجة مئوية إلى 60 درجة مئوية، وتساعد زيادة درجة الحرارة على تضخيم الهياكل المعقدة وقوالب المحتوى العالي CG؛
ب.يجب تعديل درجة حرارة التلدين المثلى بناءً على قيمة Tm التمهيدي، واختيار أقصر وقت لجمع إشارة الفلورسنت استنادًا إلى أداة Real Time PCR.
ملحوظات
يرجى ارتداء معدات الوقاية الشخصية اللازمة، مثل معطف المختبر والقفازات، لضمان صحتك وسلامتك!
