2 × PCR سوبر ميكس (مع صبغ)
يحتوي 2 × PCR Master Mix على Taq DNA Polymerase وdNTPs والمكونات الأخرى المطلوبة لـ PCR.يتميز Master Mix بثباته لمدة 3 أشهر عند درجة حرارة 4 درجات مئوية باستخدام المثبتات المخصصة لدينا.تم تحسين محلول المزيج المسبق لـ PCR التقليدي وجاهز للاستخدام عن طريق إضافة قالب الحمض النووي والاشعال.يمكن تحميل منتجات PCR مباشرة للترحيل الكهربائي باستخدام صبغة البروموفينول الزرقاء المحملة مسبقًا.تحتوي المنتجات المضخمة على نتوء 3 '-dA ويمكن استنساخها بسهولة في ناقل T.يعمل 2×PCR Master Mix على تبسيط إجراء PCR ويقلل التلوث.
شروط التخزين
يجب تخزين المنتجات في درجة حرارة -25 درجة مئوية إلى -15 درجة مئوية لمدة عامين.
تحديد
| الإخلاص (مقابل طاق) | 1× |
| بداية ساخنة | No |
| البروز | 3 '-أ |
| بوليميريز | طق DNA بوليميريز |
| تنسيق رد الفعل | سوبر ميكس أو ماستر ميكس |
| سرعة رد الفعل | معيار |
| نوع المنتج | PCR ماستر ميكس (2x) |
تعليمات
1.نظام رد الفعل
| عناصر | مقدار(ميكروليتر) |
| قالب الحمض النووي | مناسب |
| التمهيدي 1 (10 ميكرومول/لتر) | 2 |
| التمهيدي 2 (10 ميكرومول/لتر) | 2 |
| 2 × PCR ماستر ميكس | 25 |
| ddH2O | إلى 50 |
2.بروتوكول التضخيم
| خطوات الدورة | درجة الحرارة (درجة مئوية) | وقت | دورات |
| تمسخ الأولي | 94 | 5 دقائق | 1 |
| تمسخ | 94 | 30 ثانية | 35 |
| التلدين | 50-60 | 30 ثانية | |
| امتداد | 72 | 30-60 ثانية/كيلو بايت | |
| التمديد النهائي | 72 | 10 دقائق | 1 |
ملحوظة:
1) استخدام القالب: 50-200 نانوغرام من الحمض النووي الجيني؛0.1-10 نانوغرام من الحمض النووي البلازميد.
2) ملغ2+التركيز: يحتوي هذا المنتج على 3 ملم من MgCl2، وهو مناسب لمعظم تفاعلات PCR.
3) درجة حرارة التلدين: يرجى الرجوع إلى قيمة Tm النظرية للبادئات.يمكن ضبط درجة حرارة التلدين على 2-5 درجة مئوية أقل من القيمة النظرية للمادة التمهيدية.
4) وقت التمديد: لتحديد الجزيئي، يوصى بـ 30 ثانية/كيلو بايت.لاستنساخ الجينات، يوصى بـ 60 ثانية/كيلو بايت.
ملحوظات
1.منتجات PCR التي تحتوي على 2× PCR Master Mix ليست مناسبة للرحلان الكهربائي للهلام متعدد الأكريلاميد.
2.من أجل سلامتك وصحتك، يرجى ارتداء معاطف المختبر والقفازات التي تستخدم لمرة واحدة أثناء التشغيل.
3.يتم استخدامه للاستخدام البحثي فقط!
