روبوستارت طق بوليميريز الحمض النووي

Robusstart Taq DNA Polymerase هو بوليميريز DNA ذو بداية ساخنة.هذا المنتج لا يمكنه فقط تثبيط التفاعل غير المحدد الناتج عن التلدين غير المحدد للبادئات أو تجميع التمهيدي في عملية إعداد نظام PCR وتضخيمه.ولذلك، فإنه يتمتع بخصوصية ممتازة وأكثر فعالية لتضخيم قوالب التركيز المنخفض، وهو مناسب لتفاعل تضخيم PCR المتعدد.علاوة على ذلك، يتمتع هذا المنتج بإمكانية تطبيق جيدة جدًا، ويمكن الحصول على نتائج تضخيم مستقرة في أنواع مختلفة من تفاعلات PCR.

عناصر

1.5 يو/ميكروليتر بوليميريز الحمض النووي Robusstart Taq

2.10 × PCR Buffer II (Mg²+ مجانًا) (اختياري)

3.25 ملي مجكل₂(خياري)

* 10 × PCR Buffer II (Mg²+ مجاني) لا يحتوي على dNTP وMg²+، يرجى إضافة dNTPs وMgCl₂عند تحضير نظام التفاعل

التطبيقات الموصى بها

1.تضخيم سريع.

2.التضخيم المتعدد.

3.التضخيم المباشر للدم والمسحات والعينات الأخرى.

4.الكشف عن أمراض الجهاز التنفسي.

حالة التخزين

-20 درجة مئوية للتخزين طويل الأمد، يجب خلطه جيدًا قبل الاستخدام، وتجنب التجميد والذوبان المتكرر.

*إذا حدث هطول بعد التبريد، فهذا أمر طبيعي؛فمن المستحسن أن تتوازن مع درجة حرارة الغرفة قبل الخلط والاستخدام.

تعريف الوحدة

يتم تعريف الوحدة النشطة الواحدة (U) على أنها كمية الإنزيم الذي يدمج 10 نانومول من ديوكسي ريبونوكليوتيد في مادة غير قابلة للذوبان في الحمض عند 74 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة باستخدام الحمض النووي المنشط لحيوان السلمون المنوي كقالب/تمهيد.

رقابة جودة

1.SDS-PAGE نقاء الكهربي أكبر من 98%.

2.حساسية التضخيم، والتحكم من دفعة إلى دفعة، والاستقرار.

3.لا يوجد نشاط نوكلياز خارجي، ولا نوكلياز خارجي المنشأ أو تلوث نوكلياز خارجي

تعليمات

إعداد رد الفعل

ملحوظات:

1) أ.لا يحتوي المخزن المؤقت على dNTP وMg²+، يرجى إضافة dNTPs وMgCl₂عند تحضير نظام التفاعل

2) ب.إذا استخدمت لqPCR/qRT-PCR، ينبغي إضافة مجسات الفلورسنت إلى نظام التفاعل.عادة، فإن تركيز التمهيدي النهائي من 0.2 ميكرومتر سوف يعطي نتائج جيدة؛إذا كان أداء التفاعل ضعيفًا، يمكن تعديل تركيز التمهيدي في نطاق 0.2-1 ميكرومتر.عادة ما يتم تحسين تركيز المسبار في حدود 0.1-0.3 ميكرومتر.يمكن إجراء تجارب تدرج التركيز للعثور على أفضل مزيج من التمهيدي والمسبار.

بروتوكول الدراجات الحرارية

ملحوظات

1.يجب ألا يقل معدل تضخيم بوليميراز الحمض النووي السريع عن 1 كيلو بايت/10 ثانية.يختلف معدل ارتفاع وانخفاض درجة الحرارة ووضع التحكم في درجة الحرارة وكفاءة التوصيل الحراري لأدوات PCR المختلفة بشكل كبير، لذلك يوصى بتحسين ظروف التفاعل المثلى لأداة PCR السريعة المحددة.

2.النظام قابل للتكيف بدرجة كبيرة، مع خصوصية وحساسية أعلى.

3.مناسبة للاستخدام ككواشف كشف PCR عالية الحساسية، ويمكن استخدامها في تفاعلات تضخيم PCR المتعددة.

4.نشاط البوليميريز 5′→3′، نشاط نوكلياز 5′→3′؛لا يوجد نشاط نوكلياز خارجي 3′→5′؛لا وظيفة التدقيق اللغوي.

5.مناسبة للاختبار النوعي والكمي لـ PCR وRT-PCR.

6.الطرف 3′ لمنتج PCR هو A، والذي يمكن استنساخه مباشرة في ناقل T.

7.يوصى بالطريقة المكونة من ثلاث خطوات للبادئات ذات درجات حرارة التلدين المنخفضة أو لتضخيم الأجزاء الأطول من 200 نقطة أساس.