Ultra Nuclease GMP-grade
رقم القط: HC2016A
يتم التعبير عن درجة UltraNuclease GMP وتنقيتها في الإشريكية القولونية (E.coli) عن طريق الهندسة الوراثية وإعدادها في بيئات GMP.يمكن أن يقلل من لزوجة طاف الخلية ومحلول الخلية في البحث العلمي، ويزيد من كفاءة تنقية البروتين ويعزز البحث الوظيفي للبروتين.يمكن للمنتج أيضًا تقليل بقايا الحمض النووي المضيف إلى درجة PG، مما يحسن أداء وسلامة المنتجات البيولوجية للتطبيقات بما في ذلك تنقية الفيروسات، وتصنيع اللقاحات، وتصنيع الأدوية البروتينية/العديد السكاريد.علاوة على ذلك، يمكن أيضًا تطبيق المنتج لمنع تكتل خلايا الدم وحيدة النواة المحيطية البشرية (PBMC) في العلاج بالخلايا وتطوير اللقاحات.
يتم توفير UltraNuclease في شكل كاشف معقم، مشطوف في المخزن المؤقت (20 مللي مولار Tris-HCL pH 8.0، 2 مللي مولار MgCl، 20 مللي مول كلوريد الصوديوم، 50% جليسرين)، مع ظهور سائل شفاف عديم اللون.يتم إنتاج هذا المنتج وفقًا لمتطلبات عملية GMP ويتم توفيره في شكل سائل.
عناصر
UltraNuclease GMP (250 وحدة / ميكرولتر)
شروط التخزين
يتم شحن المنتج مع الثلج الجاف ويمكن تخزينه في درجة حرارة -25 درجة مئوية إلى -15 درجة مئوية لمدة عامين.
إذا تم فتح المنتج وتم تخزينه في درجة حرارة 4 درجات مئوية لأكثر من أسبوع، فإننا نوصي بالتصفيةالمنتج لمنع التلوث الميكروبي.
تحديد
| مضيف التعبير | المؤتلف E. coli مع جين UltraNuclease |
| الوزن الجزيئي الغرامي | 26.5 كيلو دالتون |
| نقطة كهروضوئية | 6.85 |
| نقاء | ≥99% (SDS-PAGE) |
| المخزن المؤقت للتخزين | 20 ملم تريس-حمض الهيدروكلوريك الرقم الهيدروجيني 8.0، 2 ملم مجكل، 20 ملم كلوريد الصوديوم، 50٪ الجلسرين |
|
تعريف الوحدة | تعريف وحدة النشاط الواحدة (U) هو مقدار الإنزيم المستخدمقم بتغيير قيمة الامتصاص لـ ΔA260 بمقدار 1.0 في 30 دقيقة في 2.625 ملنظام التفاعل عند 37 درجة مئوية مع درجة حموضة 8.0 (أي ما يعادل الهضم الكامل لل37 ميكروغرام من الحمض النووي للحيوانات المنوية في سمك السلمون إلى أليغنوكليوتيدات). |
تعليمات
1. العينة مجموعة
الخلايا الملتصقة: إزالة المتوسطة، وغسل الخلايا مع برنامج تلفزيوني، وإزالة المادة طافية.
خلايا التعليق: جمع الخلايا عن طريق الطرد المركزي، وغسل الخلايا مع برنامج تلفزيوني، وأجهزة الطرد المركزي في 6000دورة في الدقيقة لمدة 10 دقيقة، وجمع بيليه.
الإشريكية القولونية: جمع البكتيريا عن طريق الطرد المركزي، وغسلها مرة واحدة مع برنامج تلفزيوني، الطرد المركزي في 8000دورة في الدقيقة لمدة 5 دقائق، وجمع بيليه.
2. معالجة العينات
عالج كريات الخلايا المجمعة بمحلول تحلل بنسبة الكتلة (جم) إلى الحجم (مل) 1: (10-20)، أو بالطرق الميكانيكية أو الكيميائية على الجليد أو في درجة حرارة الغرفة (يحتوي 1 جم من كريات الخلية على حوالي
109 خلية).
3. العلاج الانزيمي
أضف 1-5 مم MgCl إلى نظام التفاعل واضبط درجة الحموضة إلى 8-9.
أضف UltraNuclease وفقًا لنسبة 250 وحدة لهضم 1 جرام من كريات الخلايا، واحتضانها عند 37 درجة مئوية لأكثر من 30 دقيقة.يرجى الرجوع إلى نموذج "وقت التفاعل الموصى به" لاختيار الوقت المناسبمدة العلاج.
4. طاف مجموعة
أجهزة الطرد المركزي عند 12000 دورة في الدقيقة لمدة 30 دقيقة وجمع المادة طافية.
ملحوظة: إذا كان المحلول حامضياً أو قلوياً أو يحتوي على تركيزات عالية من الملح أو المنظفات أوالمثبطات، يرجى زيادة جرعة الإنزيم أو تمديد وقت العلاج وفقًا لذلك.
ظروف التفاعل الموصى بهاإضافات
| معامل | الحالة المثلى | مكيف فعال |
| ملغ² + التركيز | 1-5 ملم | 1-10 ملم |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| درجة حرارة | 37 درجة مئوية | 0-42 درجة مئوية |
| تركيز دي تي تي | 0-100 ملم | > 0 مم |
| تركيز المركابتوإيثانول | 0-100 ملم | > 0 مم |
| تركيز الكاتيون أحادي التكافؤ | 0-20 ملم | 0-150 ملم |
| تركيز الفوسفات | 0-10 ملم | 0-100 ملم |
مُستَحسَن رد فعل وقت (37 درجة مئوية، 2 mM Mg²+، pH 8.0)
| كمية UltraNuclease (التركيز النهائي) | وقت رد الفعل |
| 0.25 وحدة/مل | > 10 ساعات |
| 2.5 وحدة/مل | > 4 ساعات |
| 25 وحدة / مل | 30 دقيقة |
ملحوظات:
يرجى ارتداء معدات الوقاية الشخصية اللازمة، مثل معطف المختبر والقفازات، لضمان صحتك وسلامتك!
